La electroforesis es un método de laboratorio en el que se utiliza
una corriente eléctrica controlada con la finalidad de separar biomoleculas
según su tamaño y carga eléctrica a través de
una matriz gelatinosa.
Fue empleado por primera vez por en el año 1937, pero su importancia
vino a incrementarse cuando en los años cincuenta E. L.Durrum y Arne
W.K. Tiselius , impulsaron la electroforesis de zona, nombre que se asigno
a la separación de materiales en un campo eléctrico en presencia
de algún tipo de soporte; aunque este termino se limito originalmente
al análisis de coloides y partículas submicroscopicas , se
ha convertido en estos últimos años en una metodología
aplicada a sustancias de bajo peso molecular.
Fundamento.
Cuando una mezcla de moléculas ionizadas y con carga neta son colocadas en un campo eléctrico, estas experimentan una fuerza de atracción hacia el polo que posee carga opuesta, dejando transcurrir cierto tiempo las moléculas cargadas positivamente se desplazaran hacia el cátodo (el polo negativo) y aquellas cargadas positivamente se desplazaran hacia el ánodo (el polo positivo).
El movimiento de las moléculas esta gobernado también por dos
fuerzas adicionales; inicialmente la fricción con el solvente dificultará
este movimiento originando una fuerza que se opone , por otro lado
las moléculas tienen que moverse en forma aleatoria o movimiento browniano
debido a que poseen energía cinética propia denominado
difusión. La energía cinética de las moléculas
aumenta con la temperatura, por ello a mayor temperatura mayor difusión.
La suma de todas estas fuerzas provoca que las moléculas no migren
de una manera homogénea, de tal manera que, si las moléculas
son colocadas en un cierto lugar de solución, los iones comenzaran
a moverse formando un frente cuya anchura aumentara con el tiempo.
Para reducir la anchura de este frente podemos reducir el movimiento de las moléculas empleando un medio que oponga mas resistencia a dicho movimiento. Una forma común de hacer esto es formar un gel. El gel consiste de un polímero soluble de muy alto peso molecular que atrapa moléculas de agua y forma un tamiz que dificulta el movimiento de los solutos, consecuentemente, la migración electroforética de las moléculas será mas lenta, pero el ensanchamiento del frente se vera reducido también.
Cuando una mezcla de moléculas ionizadas y con carga neta son colocadas en un campo eléctrico, estas experimentan una fuerza de atracción hacia el polo que posee carga opuesta, dejando transcurrir cierto tiempo las moléculas cargadas positivamente se desplazaran hacia el cátodo (el polo negativo) y aquellas cargadas positivamente se desplazaran hacia el ánodo (el polo positivo).
El movimiento de las moléculas esta gobernado también por dos
fuerzas adicionales; inicialmente la fricción con el solvente dificultará
este movimiento originando una fuerza que se opone , por otro lado
las moléculas tienen que moverse en forma aleatoria o movimiento browniano
debido a que poseen energía cinética propia denominado
difusión. La energía cinética de las moléculas
aumenta con la temperatura, por ello a mayor temperatura mayor difusión.
La suma de todas estas fuerzas provoca que las moléculas no migren
de una manera homogénea, de tal manera que, si las moléculas
son colocadas en un cierto lugar de solución, los iones comenzaran
a moverse formando un frente cuya anchura aumentara con el tiempo.
Para reducir la anchura de este frente podemos reducir el movimiento de las moléculas empleando un medio que oponga mas resistencia a dicho movimiento. Una forma común de hacer esto es formar un gel. El gel consiste de un polímero soluble de muy alto peso molecular que atrapa moléculas de agua y forma un tamiz que dificulta el movimiento de los solutos, consecuentemente, la migración electroforética de las moléculas será mas lenta, pero el ensanchamiento del frente se vera reducido también.
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